FASE 1 DE ENSAYOS CLÍNICOS DE TERAPIA GÉNICA DE FACTOR DE CRECIMIENTO NERVIOSO PARA LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER

Se realizó un ensayo de fase 1 de terapia génica ex vivo mediante la entrega de genes NGF en ocho individuos (5 mujeres y 3 varones) con enfermedad de Alzheimer leve, donde se realizó la implantación de fibroblastos autólogos modificados genéticamente (mediante vectores retrovirales) para expresar NGF humano en el cerebro anterior utilizando inyecciones estereotáxicas, con el objetivo de prevenir la degeneración colinérgica, estimular la función colinérgica y mejorar la memoria.

Aunque hubo algunos efectos adversos causando la muerte en un individuo, y solo 6 pacientes completaron la entrega de NGF de modo seguro, evaluando su cognición mediante un mini examen de estado mental (MMSE), ensayos con EA (ADAS-Cog) y con tomografía por emisión de positrones (PET).

Los análisis de la cognición revelaron una mejoría importante de esta capacidad así la tasa de progresión de la enfermedad parecía estar reducido en 36-51% durante un período medio de casi 2 años en dos medidas clínicas comunes de la función cognitiva.

Pero NGF es poco probable que "curar" la enfermedad.  Sin embargo, la desaceleración del deterioro clínico con el grado observado en este ensayo durante períodos de incluso unos pocos años representaría una terapia útil superando sustancialmente la eficacia de los tratamientos actuales para la enfermedad de Alzheimer. 
 

MINI EXAMEN DE ESTADO MENTAL

 

 

ADAS-Cog

 

 

 TOMOGRAFÍA POR EMISIÓN DE POSITRONES

 

 

 

BIBLIOGRAFÍA:

• Artículo en inglés
• Artículo en español

 

 



Las células madre neurales mejoran la cognición a través de BDNF en un modelo transgénico de la enfermedad de Alzheimer

 En la presente investigación, utilizaron los ratones transgénicos triples envejecidos (3xTg-AD) que expresan formas patógenas de Presenilina, proteína precursora del amiloide y tau para investigar el efecto del trasplante de células madre neurales autorenovantes y multipotentes, en neuropatología relacionadas con EA y la disfunción cognoscitiva El trasplante de células madre neuronales obtuvo como resultados:

• Mejora de la disfunción cognitiva, rescatando los períodos de aprendizaje y memoria en el laberinto de agua de Morris (fig. 1).
• Mejora del déficit conductual en la prueba de reconocimiento novela objeto dependiente del contexto.

 

•  Células madre neurales injertadas se diferencian en neuronas, astrocitos y oligodendrocitos en la región que rodea a la capa de células granulares del giro dentado o dentro de los tractos de sustancia blanca, incluyendo el fondo de saco fimbria y el cuerpo calloso.

•  Péptido β amiloide y proteína tau fosforilada no se ven afectadas por el trasplante de NSC.

• Un aumento del 67% en la densidad sináptica en ratones inyectados con NSC, y por ende también de la proteína sinaptofisina. Por lo tanto, este hallazgo proporciona una base estructural para la mejora observada en la cognición en los ratones inyectados 3xTg-AD-NSC.
• Aumento de factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF) podría mediar el rendimiento cognitivo mejorado mediante la mejora de la conectividad sináptica del hipocampo.
• BDNF solo puede mejorar el rendimiento de la memoria.

•   BDNF es necesario para el rescate cognitivo inducido por NSC y el aumento de la densidad sináptica.

 

En conclusión, la inyección de NSC rescata el fenotipo cognitivo en ratones transgénicos que exhiben avanzada patología relacionada EA. Los efectos beneficiosos de la NSC sobre la cognición están mediados por la elevación a nivel hipocampal de BDNF, lo que lleva a un aumento de la densidad sináptica y la restauración de la cognición.  Esto demuestra el papel fundamental del BDNF en los beneficios ocasionados por las células madre neurales.

BIBLIOGRAFÍA
Artículo relacionado en inglés
Artículo relacionado en español

VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LOS TRANSGÉNICOS

Ventajas:

1. Los ratones knockout son ampliamente utilizados para generar modelos de enfermedad humana debido a su relativo bajo costo y a su corto período de gestación, así permite tener períodos de observación más prolongados para estudiar el desarrollo de las enfermedades humanas.

 

2. Clonación de animales elite. Además de proporcionar una ruta para la generación de animales transgénicos, la transferencia nuclear podría utilizarse para realizar la imagen más popular de la clonación, esto es, la producción de cantidades ilimitadas de animales genéticamente idénticos

 

3. Los animales transgénicos permiten evaluar nuevas estrategias terapéuticas para muchas enfermedades humanas, de una forma imposible de realizar en seres humanos.Nuestras mejores esperanzas para el desarrollo de prevenciones, tratamientos y curas para enfermedades como el Alzheimer, el SIDA y el cáncer incluyen también investigación biomédica utilizando animales.

 

4. Los animales transgénicos que pueden ser potenciales donantes de órganos y que son diseñados estratégicamente para producir en sus fluidos (principalmente en la leche) proteínas humanas que son clave para el tratamiento de muchas enfermedades.

 

5. En la industria, la biotecnología animal ha experimentado un gran desarrollo en las últimas décadas con el uso de tecnologías reproductivas, la creación de organismos genéticamente modificados, la producción masiva de moléculas de interés y la prueba de productos de consumo para probar que no son dañinos.

 

Desventajas

1. Los potenciales riesgos a los que nos podríamos ver expuestos con los alimentos genéticamente modificados son el desarrollo de alergias, la resistencia a los antibióticos, la pérdida o modificación del valor nutricional de los alimentos, la presencia de compuestos tóxicos, la aparición de enfermedades nuevas y no tratables, además del daño a las especies silvestres de plantas.

 

2. Los genes marcadores usados en ingeniería genética confieren resistencia a antibióticos empleados normalmente en seres humanos y en la medicina veterinaria. Comer alimentos transgénicos que contienen estos genes marcadores podría acelerar la aparición de resistencia a antibióticos en las bacterias del intestino.

 

3. Al ser imposible insertar con exactitud un nuevo gen, la transferencia de genes puede alterar la fina red del ADN de un organismo. Los genes injertados pueden introducirse en una zona de ADN inestable, produciendo cambios incontrolados en el genoma.    

 

4. En cuanto a la bioseguridad a nivel mundial, terroristas podrían aprovechar publicaciones de secuencias patógenas y liberar organismos altamente patógenos introducidos en organismos de consumo, habiendo desarrollado previamente una vacuna.

 

5. En términos de efectos negativos sobre la salud, el mayor potencial de consecuencias adversas es la toxicidad, incluido carcinogenicidad.

 

BIBLIOGRAFÍA:

Animales transgénicos

Alimentos transgénicos

Animales transgénicos

Acta bioética del uso de transgénicos

Ética de la investigación en animales transgénicos

 

ARTÍCULO SOBRE ANIMALES TRANSGÉNICOS

ARTÍCULO: Los efectos beneficiosos de la cafeína en un modelo transgénico de la enfermedad como la tau patología de Alzheimer

 

En esta investigación se evaluaron los efectos de la ingesta de cafeína crónica (0,3 g / L a través del agua potable), dada en una etapa patológica temprana, en el modelo de ratón transgénico THY-Tau22 de la patología progresiva relacionada con la proteína Tau fosforilada de la enfermedad de Alzheimer.  Para evaluar el impacto del tratamiento de cafeína para el desarrollo de alteraciones de la memoria en ratones THY-Tau22, se realizó una prueba de laberinto acuático de Morris

Se encontró que el consumo de cafeína crónica impide el desarrollo de los déficits de memoria espacial en ratones machos tau. Mejora la memoria, además de que se asoció con una reducción de la fosforilación de tau y fragmentos proteolíticos en el hipocampo. Incluso, el tratamiento de la cafeína ha disminuido las reacciones pro inflamatorias y han encontrado varios marcadores de estrés oxidativo aumentados en el hipocampo de los animales THY-Tau22. En conjunto, los datos obtenidos apoyan que el consumo moderado de cafeína es beneficioso en un modelo de patología tau- de EA.

 

BIBLIOGRAFÍA:
Artículo relacionado

ADN RECOMBINANTE y ENFERMEDAD DE ALZHEIMER:

Los primeros trabajos en terapia génica se realizaron con ratones, mediante técnica del ADN recombinante, que consiste en introducir el ADN extraño en los embriones, de forma que dicho ADN se expresa luego completamente, a medida que desarrolla el organismo. El material genético introducido se denomina transgén; los individuos a los que se les aplica esta técnica reciben el nombre de transgénicos.

 

La Terapia Génica ha sido aplicada en humanos a las enfermedades neurodegenerativas. Esto se debe a que la mayoría de los desórdenes que se presentan a nivel del tejido cerebral se manifiestan con pérdida neuronal; de ahí que una salida para lograr la restauración del tejido dañado sea el implante de células capaces de diferenciar a neuronas, la liberación de genes con función neuroprotectora y neurorestauradora o de enzimas cuya función se afecta como consecuencia de la pérdida neuronal.

 

En este sentido, se han llevado a cabo un ensayo clínico de Terapia Génica donde se realizó la fase I de un estudio en el que se implantaron fibroblastos genéticamente modificados para liberar NGF (Factor de crecimiento nervioso) en ocho pacientes con la Enfermedad de Alzheimer. Después de 22 meses de seguimiento, no se detectaron efectos adversos asociados al procedimiento, mejoró la función cognitiva de seis pacientes y en una autopsia se demostró una respuesta significativa a la liberación de NGF.

 

A continuación un video sobre ADN recombinante:

 

 

 

BIBLIOGRAFÍA:

Artículo relacionado

TÉCNICAS MOLECULARES PARA EA:

1. Ensayos inmunoenzimáticos tipo ELISA: está basada en el principio inmunológico del reconocimiento y unión de los anticuerpos ( frente a péptidos β-amiloides y frente a la proteína tau, en su estado fosforilado o defosforilado) a las moléculas que reconocen como extrañas (antígenos).

• ELISA tipo sandwich: se emplean dos anticuerpos diferentes que se unen de manera directa a la proteína de interés, que queda atrapada entre ambos como en un sandwich.

 
• ELISA tipo competitivo: Se cuantifica la cantidad de anticuerpo libre para determinar la cantidad de proteína de interés en la muestra. Cuanto más anticuerpo libre se detecta, menos cantidad de proteína de interés contiene la muestra.

2. Western Blot: ensayo inmunoenzimático para la detección de proteínas concretas (β-amiloide, tau, etc.) de una muestra mediante el uso de anticuerpos específicos. Consta de 2 fases:

• Primera fase: en la que se produce la separación de las proteínas de una muestra mediante un proceso conocido como electroforesis.
• Segunda fase: se produce la transferencia de las proteínas a una membrana sintética, quedando éstas en su superficie. En esta membrana se produce la unión de la proteína con el anticuerpo, que lleva una enzima unida a él. Esta enzima cataliza una reacción cuyo producto final permite identificar la proteína de interés.

3. Técnicas proteómicas:

• Espectrometría de masas: es una técnica analítica para la detección de compuestos químicos y biológicos en función de su relación masa-carga (m/z). Se ha empleado como herramienta para la identificación de un alto número de marcadores biológicos para la enfermedad de Alzheimer.

 
• Microarrays de proteínas: Esta técnica permite comparar las diferencias en los niveles de expresión de miles de proteínas a la vez, en enfermos de Alzheimer y personas sanas, posibilitando la identificación de marcadores potenciales para el diagnóstico de la enfermedad.

 

4. Diagnóstico genético

• Microarrays de ADN: esta técnica se ha empleado para establecer diferencias de expresión génica entre individuos sanos e individuos con enfermedad de Alzheimer o individuos con alto riesgo de desarrollar la enfermedad. Mediante el análisis de los resultados se pueden identificar nuevos marcadores genéticos de la enfermedad, pero también obtener información acerca de los procesos que se encuentran alterados.

BIBLIOGRAFÍA:
Documento relacionado

EPIGENÉTICA Y RELACIÓN CON LA ENFERMEDAD

La Epigenética esta relacionada principalmente con el tipo de  Alzheimer Esporádico (95%). Algunas posibles o determinantes causas son ambientales y fisiológicas como por ejemplo:           

• Envejecimiento: La edad es el factor de riesgo más importante para la EA. La prevalencia de esta demencia aumenta en forma exponencial en individuos mayores de 75 años.
• Inflamación: La asociación de la inflamación con la EA se planteó a fines de los años 80 y desde entonces se han identificado mediadores de inflamación como interleuquinas, IL-1b e IL-6, y TNF a (Factor de necrosis tumoral).
• Estrés oxidativo: El Oxido nítrico (NO), se combina con superóxido (O2-), formando peroxinitrito (ONOO-), determinando estrés oxidativo y nitrosativo, asociado a daño mitocondrial, lo cual causa déficit energético contribuyendo a la alteración de la remoción de los agregados de Ab y a la disfunción neuronal, afectando la actividad de los canales iónicos y transportadores, la neurotransmisión, y el transporte neuronal.

Además la demencia tipo EA, podría ser entonces, el resultado terminal de una interacción compleja de riesgo genético, cambios atribuibles a múltiples patologías subyacentes, trauma, alteraciones ambientales y cambios hormonales entre muchos otros.

 

 

BIBLIOGRAFÍA:

Artículo relacionado

 

ALTERACIONES EN LA TRADUCCIÓN:

Todas las mutaciones, excepto una, son missense, lo que resulta en un cambio de un a.a por otro. La afectación causa la eliminación del exón 9 (se produce su deleción), no se modifica el cuadro de lectura y se produce la eliminación del sitio procesado y de los fragmentos correspondientes.

 

 

En una familia inglesa se detectó una mutación en el codón 141 del gen PS-1 con una penetrancia incompleta. La afectación se manifestó en un cambio de  isoleucina por valina.

 

El gen STM 2 (localizado en el cromosoma 1), denominado también AD 4, PS-2, se encontró y aisló en familias alemanas instaladas en el Volga. Las familias afectadas presentaban una mutación missense en el codón 141, que resultó en un cambio de ácido aspártico por isoleucina.

 

 

Otra mutación que se asocia a la enfermedad de Alzheimer familiar precoz se encuentra localizada en el codón 239 y se manifiesta en un cambio de metionina por valina.

 

Se piensa que las mutaciones en el gen de la PS-2 pueden causar un incremento en la actividad apoptóica y por consiguiente acelerar el proceso de neurodegeneración.

 

BIBLIOGRAFÍA:

Artículo relacionado

ALTERACIONES EN LA TRANSCRIPCIÓN:

Los investigadores han detectado mutaciones en la proteína precursora beta amiloide y ubiquitin-B  las cuales pueden ser responsables de la acumulación de β amiloide en las placas seniles del cerebro. Tales mutaciones no se heredan sino que parecen ser equivocaciones genéticas que ocurren durante la transcripción, el proceso de codificación en el que el ADN establece el modelo para la producción de proteínas y otras moléculas.

La proteína tau y el β-amiloide, los principales componentes de las marañas neurofobrilares y las placas seniles, respectívamente, son solubles en condiciones normales, sin embargo, en la enfermedad de Alzheimer, estas proteínas se vuelven insolubles. En los mecanismos promotores de esta insolubilidad parece que se encuentran implicadas alteraciones del metabolismo proteolítico y modificaciones post transcripcionales específicas que incluyen entrecruzamientos enzimáticos y no enzimáticos.

 

BIBLIOGRAFÍA:

http://www.geosalud.com/

Factores implicados en la patogénesis del Alzheimer

ALTERACIÓN EN LA REPLICACIÓN DEL ADN:

En la enfermedad de Alzheimer existe un fallo en la supresión del ciclo celular normal. Los marcadores de este proceso se presentan en todas las etapas de la enfermedad de Alzheimer, pero son mucho más evidentes en el límite de la fase G1-S. Esto se produce cuando las neuronas al iniciar el ciclo celular acaban duplicando la cantidad de ADN y eso hace que la neurona se convierte en tetraploide es decir, que tenga doble cantidad de materal genético.

Cuando esto sucede, se modifica  la estructura del ADN y aparecen problemas de degeneración debido  a que una neurona tetraploide se hace más grande, altera sus conexiones con las neuronas de alrededor, por tanto los circuitos neuronales dejan de funcionar bien, lo que se manifiesta en déficits cognitivos propios de la enfermedad de Alzheimer.

BIBLIOGRAFÍA:

• Artículo relacionado
• http://www.intramed.net/contenidover.asp?contenidoID=64229

ARTÍCULO DE PCR PARA LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER:

Constituyen el polimorfismo MTHRF y el APOE como factores de riesgo para la enfermedad de Alzheimer?

 

Esta investigación se basa en comprobar la correlación entre la MTHFR y la apolipoproteína E (APOE) polimorfismos como factores de riesgo para la enfermedad de Alzheimer.

Muestra: estudio de casos y controles. Los casos incluyeron 30 pacientes con EA probable y los controles incluyeron 29 individuos sin demencia según pruebas neuropsicológicas.

Métodos:

• El ADN de cada paciente fue aislado a partir de leucocitos periféricos de 1m de sangre venosa, anticoagulada con EDTA mediante el kit de purificación de ADN genómico de sangre GFX.
• Genotipado de la ApoE se llevó a cabo mediante amplificación del tercer exón del gen APOE por PCR con los cebadores, seguido por un clivaje enzimático con la enzima de restricción Hha I (RLFP). Se obtuvieron fragmentos de APOE4, APOE3 y APOE2.

• Para detectar el alelo mutante de la MTHFR, se examinaron las mismas muestras de ADN leucocitos. La PCR se realizó con los cebadores descritos por utilizando la enzima de restricción HinfI para identificar la mutación.

 

 

Resultados:

• La presencia del alelo E4 como un factor de riesgo de EA
• La presencia del alelo E2 sugiere un efecto protector para la EA.
• En poblaciones caucásicas el alelo E3 es el más común, con un porcentaje del 77%.
• La frecuencia el alelo MTHFR no mostró diferencias significativas en los grupos de control y de casos.

Conclusión:

• El alelo APOE4 es un factor de riesgo para la EA mientras que el alelo APOE2 aparece como un factor protector para la EA; además la presencia del alelo E4 demostró un efecto dependiente de la dosis

• EL alelo MTHRF no mostró una relación significativa con EA

BIBLIOGRAFÍA:
Artículo relacionado
Artículo en español



PRUEBA CONFIRMATORIA

El diagnóstico se basa primero en la historia y la observación clínica, basada en las características neurológicas y psicológicas, así como en la ausencia de condiciones alternativas, es decir un diagnóstico de exclusión. Durante una serie de semanas o meses se realizan pruebas de memoria y de funcionamiento o evaluación intelectual. también se realizan análisis de sangre y escáner para descartar diagnósticos alternativos. El diagnóstico de la enfermedad de Alzheimer se basa en la presencia de ciertas características neurológicas y neuropsicológicas, ausencia de un diagnóstico alternativo y un escáner cerebral para detectar signos de demencia.

 En conclusión no existe un test pre mortem para diagnosticar concluyentemente Alzheimer. Se ha conseguido aproximar la certeza del diagnóstico a un 85% pero el definitivo debe hacerse con pruebas histológicas sobre tejido cerebral, generalmente obtenidas en la autopsia.

 

 

 

 

BIBLIOGRAFÍA:

http://www.arqhys.com/general/demencia-tipo-alzheimer.html

PRUEBA DE TAMIZAJE:

Como instrumento de tamizaje para la detección de demencia en pacientes adultos mayores con sospecha de enfermedad de Alzheimer, la prueba del reloj con 10 puntos puede ser importante para su uso durante la práctica clínica diaria, dado que un resultado normal aleja la posibilidad de demencia y por consiguiente la realización de otros exámenes innecesarios, por el contrario una prueba con muchos errores alerta al clínico para realizar estudios adicionales que evaluarán la posibilidad de demencia en el paciente.

• PRUEBA DE RELOJ:
• Aplicación: es fácil, rápida y psicológicamente no intrusiva para el paciente.
• Habilidades cognitivas evaluadas:  comprensión auditiva, planeamiento, memoria visual y reconstrucción de una imagen gráfica, habilidades visuo-espaciales, programación motora y ejecución, conocimiento numérico, pensamiento abstracto,  inhibición de la tendencia a colocar por características perceptuales del estímulo  concentración y tolerancia de la frustración.
• Criterios diagnósticos: Los déficit visuoespaciales son signos precoces y frecuentes en la demencia tipo Alzheimer.
• Características: sensibilidad (capacidad de la prueba para detectar la enfermedad en sujetos enfermos) de 48 a 94% y especificidad (capacidad de la prueba para detectar la ausencia de la enfermedad en sujetos sanos) de 42 a 97%.

 

BIBLIOGRAFÍA:

http://sisbib.unmsm.edu.pe/bvrevistas/anales/v65_n1/evaluacion.htm

http://www.janssen.es/herramientas

DEFINICIÓN:

La enfermedad de Alzheimer, mal de Alzheimer o demencia senil de tipo Alzheimer (DSTA), es una enfermedad neurodegenerativa irreversible y progresiva que se manifiesta como deterioro cognitivo y trastornos conductuales. Es la causa más común de todas las demencias, la cual se  caracteriza por una pérdida de la memoria inmediata y de otras capacidades mentales, a medida que las células nerviosas mueren y diferentes zonas del cerebro se atrofian. Generalmente esta patología suele aparecer a partir de los 60 a 65 años, aunque también puede presentarse en gente más joven. Actualmente no existe tratamiento, pero se pueden aliviar los síntomas y mejorar el cuidado y la calidad de vida del enfermo y de la familia. 
 

 

 

BIBLIOGRAFÍA:

http://neural.es/wp-content/pdf/Alzheimer.pdf

BIENVENID@S

Este blog tiene el propósito de informar los aspectos relevantes acerca de la Enfermedad de Alzheimer que cada vez afecta con más frecuencia a la población mundial específicamente a las personas de edad avanzada y posee un índice de morbilidad y mortalidad importante en el Ecuador y en los demás países del mundo, por tal motivo es importante conocer más acerca de esta patología  pretendiendo así brindar a los pacientes una mejor calidad de vida, un tratamiento adecuado y recomendaciones para el cuidado de los pacientes por parte de sus familiares.

Hacer clic aquí para visualizar el siguiente video en donde se muestra una información general sobre la Enfermedad de Alzheimer: